分析方面电大毕业论文范文 与不同产地知母中知母皂苷BⅡ和芒果苷的HPLC分析有关学年毕业论文范文

《不同产地知母中知母皂苷BⅡ和芒果苷的HPLC分析》

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一、研究的意义BⅡ对照品适量,混合均匀后按照供试品溶液的制备及含量测定方法同法

知母为百合科植物知母 Anemarrhena asphodeloides Bge.的干燥根茎,操作,测定知母皂苷 BⅡ的含量,结果为知母皂苷 BⅡ平均回收率为

主产于河北、安徽、山西、内蒙古等地.知母始载于《神农本草经》,具有清热99.09%,RSD为 1.68%.

泻火、生津润燥、止渴除烦等功效,用于外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨1.9不同产地知母样品中知母皂苷 BⅡ含量测定：按照上述条件、方蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘[1]等病证.知母的化学成分主要为甾体皂苷、双法,别精密吸取对照品溶液 5μl、10μl,供试品溶液 8μl,注入液相色谱

苯吡酮类、木脂素类、多糖类等,活性成分主要是甾体皂苷[2],如知母皂苷 B仪,测定,用外标两点法对数方程计算,即得样品中知母皂苷 BⅡ的含量,

Ⅱ(timosaponinBⅡ)、芒果苷(mangiferin)等.现代研究表明,知母具有抗菌、含量结果见表 1,色谱图见图 1、图 2.

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检测器 1

检测器1知母皂甘BII.met

知母皂甘BII.met

解热、利胆、降血糖、降血脂等方面的药理作用[3].知母虽为单一品种,但分

2016--et-Re.

1-2916-3808知母皂甘BII.mp2dat

2016-1-3-36知母皂甘BII.m.

2919-4et-Rep2dat

面积

面积

3066283 3.178 8158

700 保留时间

700 700 保留时间

理论塔板数(USP)

理论塔板数(USP)

布较广,各地产药材之间品质差异较大.本文采用了高效液相色谱 -蒸发

光散射检测法 (HPLC-ELSD法)及高效液相色谱–二极管阵列检测法

2353498 3.231 8665

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(HPLC-DAD法)比较了多个不同产地知母中知母皂苷 BⅡ和芒果苷的含

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量[4],为更好地控制知母药材的质量提供了依据.

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二、仪器与材料

Agilent 1260高效液相色谱仪 (美国安捷伦科技有限公司)；DAD检测器；Alltech 6000型蒸发光散射检测器、CBL-Model9960D型超声振荡仪、Sartorius BSA 224S型电子天平；甲醇和乙腈(色谱级,安徽时联特种溶剂股份有限公司),磷酸(分析级,维科特天津化工产品贸易有限公司),水为超纯水.其余试剂均为分析纯,芒果苷对照品(批号 111607-201503,中国食品药品检定研究院).知母皂苷 BⅡ对照品(批号 111839-201505,中国食品药品检定研究院).知母药材采集于山西、河北、吉林、安徽等地.

三、研究方法与结果

1.知母皂苷 BⅡHPLC-ELSD含量测定

1.

1色谱条件：色谱柱：Ultimate XB C18(4.6×250mm,5μm)；流动相：乙腈 -水 (25：75)；柱温为 35℃；ELSD漂移管温度：110℃,载气流速：3ml/min；对照品进样量为 5μl、10μl,供试品进样量为 8μl.

1.

2对照品溶液的制备：取知母皂苷 BⅡ对照品适量,精密称定,加30％丙酮制成每 1ml含 0.50mg的溶液,即得.

1.

3供试品溶液的制备：取知母药材粉末(过三号筛)约 0.15g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入 30％丙酮 25ml,称定重量,超声处理(功率400W,频率 40kHz)30min,取出,放冷,再称定重量,用 30％丙酮补足减失的重量,摇匀.滤过,取续滤液,即得.

1.

4线性关系考察：精密吸取对照品溶液 1μl、5μl、10μl、15μl、20μl、25μl分别进样,注入液相色谱仪中,测定色谱峰面积的标准曲线为：Y等于1.551x-5.604,r等于0.9993,在 0.5~12.5μg范围内线性关系良好.

1.

5精密度试验：精密吸取上述对照品溶液各 10μl,连续进样 6次,测定知母皂苷 BⅡ峰面积,RSD为 0.12%（n等于6）.

1.

6重现性试验取同一批次的知母饮片粉末 6份,精密称定,按 3.1.3项下方法制备供试品溶液,进样 10μl,测定知母皂苷 BⅡ含量平均为

7.

56%,RSD为 1.01%.

1.

7稳定性试验：取供试品溶液放置室温,每次进样 10μl,分别在 0、4、8、16、24、32h测定,峰面积的 RSD为 0.51%,表明样品在 32h内稳定.

1.8加样回收率考察：取知母药材粉末 0.15g,精密称定,加入知母皂苷

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图 1知母皂苷 BⅡ对照品 HPLC–ELSD色谱图图 2知母皂苷 BⅡ供试品 HPLC–ELSD色谱图

2.芒果苷 HPLC-DAD含量测定

2.

1色谱条件：色谱柱：Wondasil C18(4.6×200mm,5μm)；流动相：乙腈 -0.1%磷酸水溶液(16:84)；流速为 1.0mL/min；检测波长为 258nm；柱温为 35℃；进样量为 10μl.

2.

2对照品溶液的制备：取芒果苷对照品适量,精密称定,加稀乙醇制成每 1ml含 50μg的溶液,即得.

2.

3供试品溶液的制备：取知母饮片粉末(过三号筛)约 0.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇 25ml,称定重量,超声处理(功率 400W,频率 40kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀.滤过,取续滤液,即得.

2.

4线性关系考察：精密吸取对照品溶液适量置容量瓶中,用稀乙醇配制成含芒果苷浓度 1.0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0μg·ml-1的对照品溶液,依次取上述溶液各 10μl注入液相色谱仪中,以芒果苷的浓度为横坐标(x),峰面积为纵坐标(y)绘制标准曲线,并进行线性回归,结果芒果苷的标准曲线为：Y等于72897x-21322,r等于0.9999,在 1.0~40.0μg·ml-1范围内线性关系良好.

2.

5精密度试验：精密吸取上述对照品溶液各 10μl,连续进样 6次,测定峰面积,RSD为 0.94%（n等于6）.

2.

6重现性试验：取同一批次的知母饮片粉末 6份,精密称定,按 3.1.3项下方法分别制备供试品溶液,进样 10μl,测定芒果苷含量平均为

1.

25%,RSD为 1.51%.

2.

7稳定性试验：取同一供试品溶液放置室温,分别在 0、4、8、16、24、32h进样 10μl测定样品含量,峰面积的 RSD为 1.67%,表明样品在 32h内稳定.

2.8加样回收率考察：取一定量已知含量的样品 6份,加入含芒果苷的高、中、低三个浓度的对照品溶液适量,混合均匀后按照供试品溶液的制备及含量测定方法同法操作,结果为芒果苷平均回收率为 99.48%,RSD为

1.

44%.

2.

9不同产地知母样品中芒果苷含量测定：按照上述条件、方法,测定样品中芒果苷的含量,含量结果见表 1,色谱图见图 3和图 4.

m

in

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AU0 25 50 75 100 125 150 175 DAD1A,Sig等于258,4Ref等于off(E:\001?\?\?2016-01-2716-09-27\?2.D) 6.834 min0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 mAU0 25 50 75 100 125 150 175 DAD1A,Sig等于258,4Ref等于off(E:\001?\?\?2016-01-2716-09-27\?13.D) 6.607

图 3

芒

果

苷

对

照

品

HPLC –

DAD色

谱

图

图 4芒果苷供试品 HPLC –DAD色谱图

四、讨论

本法首先采用二极管阵列检测器,对知母药材进行全波长扫描,建立知母药材全波长三维扫描图谱,确定了知母药材的最大吸收波长为

（258nm）芒果苷,同时比较了多种比例的流动相包括乙腈 -磷酸溶液、乙腈 -甲酸溶液、乙腈 -冰醋酸水溶液、甲醇 -冰醋酸水溶液的分离效果,结果以乙腈 -0.1%磷酸水溶液（16:84）的分离效果为优,分离度较好,保留时间适中,无干扰杂峰.并采用蒸发光检测器对知母中知母皂苷 BⅡ进行了检测；通过以知母皂苷 BⅡ和芒果苷含量为指标比较不同产地的知母药材质量.试验结果表明,不同产地的知母中知母皂苷 BⅡ和芒果苷的含量有显著差别,以山西产地和河北易县品质为最优.因此本法为知母药材的质量控制,为不同产地的知母药材的收购及栽培等提供了有效依据.

表 1不同产地知母药材知母皂苷 BⅡ和芒果苷含量

编号

产地

知母皂苷 BⅡ含量（%）

芒果苷含量（%）

1

吉林长春

6.56

0.77

2

吉林辽源

6.82

0.85

3

吉林四平

6.19

0.96

4

山西永济

7.95

1.61

5

山西运城

8.12

1.59

6

山西太原

7.86

1.66

7

山西定襄

7.93

1.53

8

山西临汾

7.65

1.64

9

安徽亳州

6.51

0.92

10

河北石家庄

6.56

1.01

11

河北易县

7.69

1.65

12

河北保定

6.53

1.12

13

河北安国

6.81

0.99

14

河北永德

6.95

1.03

15

河北邯郸

6.01

1.21

参考文献

[1]吉星,冯凡.知母中皂苷类成分研究进展[J].中草药,2010,41(4)：附 12-附

15.

[2]韩兵,李春梅,李敏等.知母皂苷的降脂及抗动脉粥样硬化作用[J].上海中医药杂志,2006,40(11)：68-70.

[3]罗洁,范旭航,崔思娇等.知母的 UPLC、指纹图谱及聚类分析[J].中国现代应用药学,2013,30(1)：28-31.

分析论文参考资料：

归纳总结：本文论述了适合不知如何写知母和知母皂苷B和不同产地知母方面的分析专业大学硕士和本科毕业论文以及关于分析论文开题报告范文和相关职称论文写作参考文献资料。