原创《微生物发酵法提取魔芋飞粉中神经酰胺的初步》
该文是关于微生物发酵论文范本跟神经酰胺和魔芋和发酵方面专科开题报告范文。
摘 要：本文通过实验证明,微生物发酵法确实能够有效完成提取魔芋飞粉中的神经酰胺,并且在实验过程中几乎不会产生任何有毒有害物质,其简单便捷的操作和低廉的实验成本也证明微生物发酵法具有良好的应用价值.
关键词：微生物发酵法；魔芋飞粉；神经酰胺
目前,国内外关于神经酰胺提取已经取得了大量的研究成果,并且随着科学技术的不断发展,神经酰胺提取已经开始朝着产业化的方向发展.有研究发现,魔芋飞粉含有大量的神经酰胺,而我国本身拥有丰富的魔芋飞粉资源,因此,越来越多的专家学者开始将研究目光放置在从魔芋飞粉中提取出神经酰胺[1].在此背景下,本文将以实验的方式,尝试探究微生物发酵法提取魔芋飞粉中的神经酰胺,希望能够为相关研究人员提供一定的参考和启示.
一、材料与方法
实验材料与仪器设备.为有效证明微生物发酵法在魔芋飞粉提取神经酰胺中的实际效用,本文将采用实验分析的方式进行探究.选择魔芋飞粉作为原料,辅料和菌种则分别为LB培养基和蜡状芽孢杆菌.除此之外,在实验中还需要使用恒温培养箱、气浴恒温振荡培养箱、电子天平、旋转蒸发器、红外分光光度计、紫外分光光度计、高效液相色谱仪、硅胶、乙酸乙酯、石油醚、醋酸、无水甲醇、硅胶板等.与此同时,为确保能够顺利完成显色反应,在实验中还需要使用茜素－乙醇显色剂,即使用一定量的乙醇对0.1g茜素进行溶解之后将其定容至100mL.而展开剂则是按照19v︰0.9v︰0.1v的比例将氯仿、甲醇和醋酸配比完成.
实验方法.（1）发酵产物的制备：在容量为500mL的三角瓶当中准确放入经过精确称取的适量魔芋飞粉,以5％的比例与灭菌后的LB培养液混合,再以20％的接种量加入蜡状芽胞杆菌,在32℃、120r/min的气浴恒温振荡器里培养24h后取出,按1︰1加入乙酸乙酯进行萃取,取乙酸乙酯层,经旋转蒸发浓缩,放4℃冰箱,得到的结晶物备用.在计算提取率的过程中,通常是将提取物的克数和魔芋飞粉的克数进行作比,而后乘以100％即可.（2）发酵产物的定性分析：①薄层色谱分析：在温度被控制在100－105℃的烘箱当中,对硅胶板进行0.5h活化,此后使用毛细管将吸取的适量发酵产物在与完成活化之后的硅胶板底端相距1.5cm的位置处进行点样,确保相邻两个点之间的距离不小于1cm,并且每一个点至少能够保证拥有3mm的直径,而每一个点大约为3μL－5μL.之后需要按照9.5v︰1v︰0.5v的比例依次将二氯甲烷、甲醇和醋酸配比成溶剂,并逐渐将其展开在层析缸当中.然后在展开室中,将已经完成点样的硅胶板放入进行展开.当展开液跑至硅胶板上端1cm时,取出,凉干,再用浓度为0.1％的茜素－乙醇显色剂进行喷雾显色,并在紫外下观察有无显色斑点.②紫外光谱分析：将结果用适量乙醇溶解,并以乙醇作为空白对照,在将波长控制在200－400nm之后,对结晶产物使用紫外可见分光光度计进行紫外光谱分析,根据获得的相关数据和光谱图,准确判断在结晶产物当中有无紫外发色基团.③红外光谱分析：结晶产物通过使用傅立叶变换红外光谱仪进行红外光谱扫描,根据获得的红外光谱图对结晶产物当中有无神经酰胺特殊基团包括羰基、羟基等进行准确判定.
二、结果与分析
薄层色谱分析.在本次关于微生物发酵法提取魔芋飞粉中神经酰胺的实验当中,选择使用茜素－乙醇显色剂,该种显色剂与其他普通的显色剂相比,拥有较强的专属特性,在接触到酰胺类物质之后,茜素－乙醇显色剂可以在短时间内出现十分明显的显色反应.此时在薄层板上进行喷雾显示,如果实验人员发现薄层板中间位置处显示出清晰条带,则代表显色反应良好,也就是说薄层板中显示出的物质基本上可以断定为神经酰胺类物质[2].而在本实验当中,茜素－乙醇显色剂同样发挥出了应有效用,薄层板中间位置处的条带十分明显,具有良好的重现性,该物质为神经酰胺类物质的可能性非常大.
紫外光谱分析.通过使用紫外光谱对经过薄层层析分离、疑似为神经酰胺类的物质进行扫描之后,我们可以发现其在200nm－400nm的波长范围之内无任何吸收峰值,因此我们可以推断在神经酰胺当中几乎不存在紫外发色基团.
红外光谱分析.而在使用红外光谱对神经酰胺的粗提取物进行分析的过程中,根据红外光谱图中直接显示出的神经酰胺粗提取物峰值,我们可以判断出在神经酰胺的粗提取物当中存在羟基、羰基以及酰胺基[3].官能团确定如下：IR(KBr)vmaxcm-1中1384以及1465存在吸收峰,这表明确实有羟基或是酰胺基存在于化合物当中；IR(KBr)vmaxcm-1中2865以及1060存在吸收峰,这表明确实有长碳链存在于化合物当中；IR(KBr)vmaxcm-1中3452以及1625存在吸收峰,这表明确实有一个以上的羟基存在于化合物当中；IR(KBr)vmaxcm-1中1670－1640存在吸收峰,这表明有C等于C键存在于化合物当中.
三、结论
本文在对微生物发酵法提取魔芋飞粉中神经酰胺进行实验探究的过程中,通过使用薄层层析和紫外、红外光谱分析的方法,确实为魔芋飞粉提取神经酰胺提供了重要的帮助.
在实验过程中清晰显示,薄层层析的效果并非完美,其重现表现差强人意.在将大薄层板展开,并且在使用混合试剂的过程当中容易出现边缘和解混现象,很大程度上影响了色谱图的保存效果.而在试验中,为了能够成功从魔芋飞粉中提取出神经酰胺,所用的混合有机溶剂其粘度均相对较低,并且可以在一定程度上溶解制备样品,而在与有级性差别溶剂相互混合并将其作为展开剂的情况下,则容易导致在实验过程中出现解混的情况,不利于展开效果的进一步优化.这需要在今后的提取过程中,对操作方法以及选择试剂等进行进一步的调整和研究分析,进一步保证提取不受到影响,确保实验结果的准确性.
在完成全部实验之后,实验数据显示,茜素－乙醇显色剂与其他普通的显色剂相比,拥有较强的专属特性,在接触到酰胺类物质之后,茜素－乙醇显色剂可以在短时间内出现十分明显的显色反应.且官能团显示,在使用红外光谱对神经酰胺的粗提取物进行分析的过程中,根据红外光谱图中直接显示出的神经酰胺粗提取物峰值,我们可以判断出在神经酰胺的粗提取物当中存在羟基、羰基以及酰胺基.实验的结果显示,微生物发酵法确实能够有效完成提取魔芋飞粉中的神经酰胺,并且在实验过程中几乎不会产生任何有毒有害物质,其简单便捷的操作和低廉的实验成本也证明微生物发酵法具有良好的应用价值.但本文只是对微生物发酵法提取魔芋飞粉中神经酰胺进行初步研究,关于魔芋飞粉当中神经酰胺的功能以及微生物发酵法能否实现神经酰胺提取的产业化发展等方面并没有进行深入研究,还需在日后进一步深化改进[4].（课题：乐山市科技局项目,编号16NZD053）
微生物发酵论文参考资料：
本文结束语:本文是一篇关于神经酰胺和魔芋和发酵方面的微生物发酵论文题目、论文提纲、微生物发酵论文开题报告、文献综述、参考文献的相关大学硕士和本科毕业论文。
