原创《纳曲酮对肝癌HepG2的VEGF的mRNA表达的抑制作用》
该文是关于肝癌相关论文范例与纳曲酮和甲基纳曲酮和肝癌HepG2方面论文范例。
肝癌是全球第五大癌症,其死亡率排世界第二[1].在肝癌的分型中,原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma HCC) 占据了90% 以上,因其高发率和异质性引起广泛关注[2] 在癌症患者自觉症状中, 癌性疼痛是癌症患者常出现的主要症状之一,晚期癌症患者中有70%~90% 者伴有不同程度癌痛,其中中度疼痛占50%,重度疼痛占30%[3].纳曲酮（MNTX）是首个用于泻药治疗OIC 无效时用于临床的阿片类药物拮抗剂.而本篇着重探讨纳曲酮肝癌HepG2 细胞VEGF 的mRNA 的影响,对肝癌患者的治疗及疼痛管理将有所参考.
1 材料与方法
1.1 实验材料
人肝癌细胞株HepG2 由广西医科大学附属肿瘤医院中心实验室提供.血清购于gibco 公司.DMEM 培养基购自gibco 公司.逆转录试剂盒及荧光定量PCR 试剂盒购自Toyobo 公司.TRIzol Reagent 购自Invitrogen 公司（美国 ）；PCR primer 广州艾基生物合成,并PAGE 纯化.
1.2 方法
1.2.1 细胞培养
HepG2 人肝癌细胞培养于含10% 胎牛血清DMEM 培养液中,在 37℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养、传代.
1.2.2 荧光定量
PCR 检测VEGF mRNA 表达水平.以0.01μmol 纳曲酮、0.05μmol 纳曲酮、0.1μmol 纳曲酮作用于肝癌HepG2 细胞,同时以等体积生理盐水处理组为空白对照组.各组分别培养72h 后,以Trizol 法提取细胞总RNA,测RNA 含量、浓度.按逆转录试剂盒说明书进行操作,获得cDNA.荧光定量PCR 用SYBRGreen 染料为荧光检测信号,荧光实时定量聚合酶链反应（Real-time quantitativepolymerase chain reaction,RT- qPCR）在八联管中反应,每组每个基因设3 个复孔.RT-qPCR 引物见表1.反应条件：95℃ 预变性 2 min,95℃变性 15 s,60℃退火并延伸 30s,共 40 个循环.数据采用2- △△ Ct 法进行分析.每次实验设3 个副孔,重复3 次.
2 结果
2.1 肝癌HepG2 细胞VEGF 的检测结果
作用72h 后肝癌HepG2 细胞的VEGF在mRNA 水平表达 低浓度组、中浓度组、高浓度组相对表达量分别为0.75&plun;0.03、0.58&plun;0.05、0.47&plun;0.04 .各组均与对照组相比具有显著性差异（F等于107.9,p等于0.000）,且具有时间依赖关系.
3 讨论
癌症所致的疼痛极大地降低了癌症患者的生存质量.因此疼痛需要规范的治疗[4].阿片类药物导致的胃肠道功能障碍主要由于μ 阿片受体作用于胃肠道导致,最常用的减轻阿片类药物性便秘的是使用通便的泻药,但使用不当时很可能无效[5].阿片类受体拮抗剂作为治疗OIC 的药物的发展.这些阿片受体拮抗药物可以特异性结合μ 阿片受体的外周阿片受体,从而有效地制约了胃肠道外周作用.纳曲酮在临床上是一种广泛使用的阿片类受体拮抗药,常用于使用阿片类药物治疗癌痛和术后镇痛导致的便秘并且不影响其中枢镇痛作用.有研究表明纳曲酮对于前列腺癌具有一定的抑制作用,其在肝癌中的作用还未见报道.
VEGF 是一种肝素结合内皮细胞生长因子,对血管内皮细胞生长因子特定体内能诱导血管生成[6] 有研究表明相比较于肝癌患者的VEGF( ? )/(+) 群体 ,VEGF(++)/(+++) 群体在有远处转移, 血管侵犯,AFP > 400 ng/m 占据的比例显著更大,且VEGF 的过表达与患者的转移,血管侵犯,生存率有关[7].荧光定量PCR 检测, 作用72h 后肝癌HepG2 细胞的VEGF 在mRNA水平表达 低浓度组、中浓度组、高浓度组分别为0.75&plun;0.03、0.58&plun;0.05、0.47&plun;0.04,各组均与对照组相比具有显著性差异（F等于107.9,p等于0.000）,且具有时间依赖关系.
纳曲酮可以下调HepG2 人肝癌细胞的VEGF 在mRNA 水平上的表达.本研究为临床上在治疗肝癌患者时应用纳曲酮提示了方向.
（通讯作者：阮林）
肝癌论文参考资料：
归纳上文：此文为一篇适合纳曲酮和甲基纳曲酮和肝癌HepG2论文写作的大学硕士及关于肝癌本科毕业论文，相关肝癌开题报告范文和学术职称论文参考文献。
