原创《加州鲈诺卡氏菌的诊断方法和预防关键》
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诺卡氏菌病是加州鲈养殖中后期危害最严重的细菌性疾病,发病率高,治疗难度大,损耗率大.认识诺卡氏菌病,是每一位加州鲈养殖户必备的基本功.
一、病原-鰤鱼诺卡氏菌(Nocardiaseriolae)
能侵害鱼类的诺卡氏菌主要有3 种, 分别为星状诺卡氏菌（N.asteroides）、鰤鱼诺卡氏菌（N.seriolae）和杀鲑诺卡氏菌（N.salmonicida）.但据相关文献和我们的检测,从珠三角地区养殖加州鲈分离到的所有诺卡氏菌均为鰤鱼诺卡氏菌（N.seriolae）.
鰤鱼诺卡氏菌,为一种革兰氏阳性菌,隶属细菌届、放线菌门、放线菌纲、放线菌目、诺卡氏菌科.该菌以腐生为主,专性需氧,具有弱抗酸性,无运动性,最适温度25-28℃,最适盐度0-1.0%,适宜pH 范围5.8-8.5,最适pH 为6.5-7.0.
鰤鱼诺卡氏菌的菌丝呈杆状、分枝,长约2-5μm,在宿主病灶处相互交错、聚集成团（光学显微镜放大400倍清晰可见）.该菌能在血琼脂平板、营养琼脂培养基、脑心浸液琼脂培养基等多种培养基中生长,其中,在血平板中生长相对较快,2-5 天即可长出明显菌落；而在脑心浸液琼脂培养基生长较慢,需4-10 天才能长出明显菌落；菌落呈白色或淡,砂粒状,粗糙,边缘不整齐,有时表面凸起形成褶皱.
据相关研究,鰤鱼诺卡氏菌具有多种表型和基因型,其分型与地域差异与宿主关系不大.Iail 等研究发现,α- 葡萄糖苷酶阳性菌株对盐酸土霉素有抗性,对红霉素敏感；而α- 葡萄糖苷酶阴性菌株对盐酸土霉素敏感,绝大部分（97.9%）对红霉素有抗性.据我们实验室内部试验,分离到的菌株均对氟苯尼考、强力霉素等相对敏感.
二、流行特点
从发病季节看,珠三角地区,每年4-11 月流行,水温15-32℃均可发病,其中,一龄鱼以10-11 月份发病最为严重,二龄鱼以4-5 月份最为严重；其他月份（12 月- 次年2 月）,诺卡氏菌病为潜伏状态,一般不会发病死鱼,但如果气温持续偏暖,也可引起持续少量死鱼.
从发病规格看,经我们确诊的、自然感染诺卡氏菌病的加州鲈最小规格为全长22cm.大于此规格的加州鲈,均易感染诺卡氏菌病；而小于此规格的加州鲈,尽管也有部分病鱼会出现类似诺卡氏菌病的常见症状如肝脏白斑等,但此类病鱼观察不到疑似诺卡氏菌菌丝,也分离、培养不到疑似致病菌.
从发病规律看,在流行季节,易感规格的加州鲈均可发病,在杀虫、换水、过度投喂等节点后发病率极高.一旦发病,即使彻底治愈,也容易复发；而且,一旦当年发病,如果不彻底清塘,来年也发病的概率超过90%.
三、病症
据相关文献,鰤鱼诺卡氏菌病的主要病理变化为内脏形成或白色结节.但是,据我们检测,诺卡氏菌病表现的症状十分复杂,不断有新的病症出现（如浅表性溃疡,创口鲜红）；另一方面,也有一些疾病表现出与诺卡氏菌病类似的症状（如苗期肝脏白斑等）.
1. 活动状态：病鱼常见体色偏黑,迟钝,乏力,浮游于水面.但也有部分病鱼活力较强.
2. 体表：病鱼体表常形成斑点状出血,浓疮,或者浅表性溃烂（患处鲜红）.有时体表完好,并无异常.
3. 口腔：少数病鱼口腔可见溃疡斑.
4. 眼睛：部分严重感染的病鱼可见眼睛膨大凸起.
5. 鳃：部分病鱼鳃丝有大量白色结节,尤以秋冬季常见；但也有部分病鱼鳃丝鲜红,并无异样.
6. 肌肉：部分病鱼肌肉有白色结节.
7. 内脏：部分病鱼有大量腹水；多数病鱼的肝脏、脾脏、肾脏、心脏、鳔腔表面等有白色结节,部分病鱼肠系膜也有白色结节；部分病鱼在后肾处形成巨大的囊肿物.
四、诊断要点
随着养殖环境的日益恶化及盲目用药的加剧等原因,加州鲈诺卡氏菌病出现越来越多的新症状.要正确诊断诺卡氏菌病,就要对诺卡氏菌病的症状有深刻、全面的认识,仔细、全面观察病症,并灵活应用光学显微镜,必要时联系专业的诊断机构协助确诊.具体的诊断方法见表1.
此外,应注意朝苗阶段的肝脏白斑与诺卡氏菌病白色结节的区别（前者仅限于肝脏,内脏分离培养不到致病菌；后者症状较多,结节分布广泛,内脏可分离培养到诺卡氏菌）,注意养殖中后期的爱德华氏菌病与诺卡氏菌病的区别（前者结节仅限于脾脏,肾脏常见整体肿大,镜检有时也可见结节,致病菌在脑心浸液培养基上生长相对较快,圆形,湿润,边缘整齐；后者结节分布广泛,致病菌在脑心浸液培养基上生长缓慢,沙粒状,粗糙,镜检呈山丘状,边缘不规则）.
五、预防方法
广义上,可借鉴鱼病的三环理论,从改善水体环境、消灭病原菌、增强鱼体体质和抗病力着手.其一,改善水体环境,如合理使用微生态制剂,使水质清爽,确保溶氧充足,为加州鲈营造优良的水环境；其二,消灭病原菌,如弃投冰鲜,切断食源病原菌,定期进行改底,减少底部致病菌数量；其三,投喂优质饲料,或定期内服护肝产品,提高免疫力.
具体的,结合病原菌的生物学特性（弱抗酸性）以及我们的经验（杀虫、换水或过度投喂等节点后发病率极高）,预防诺卡氏菌病的关键点：1. 合理调控pH,维持弱碱性（以下午pH8.3 左右为宜）.
鰤鱼诺卡氏菌具有弱抗酸性,在弱酸水体更容易获得生态优势.到了养殖的中后期阶段,由于池塘底部积累了大量的鱼类粪便等有机物,这些有机物在缺氧状态下发酵产生酸性物质,加之池塘生物量大,呼吸作用强,池塘的水体和底泥往往偏酸,必需人为进行调控.调控pH 的药物有石灰、小苏打（碳酸氢钠）、有益菌等,具体方案应在专业人士的指导下使用.
2. 谨慎杀虫或换水.
鰤鱼诺卡氏菌是一种条件致病菌,在自然水体、底泥中广泛存在.根据我们从一线收集到的信息,杀虫、换水等节点后诺卡氏菌病的发病率明显高于平时.其中缘由,杀虫或换水会引起水质突变和鱼体应激,造成鱼体免疫力下降,给病原菌的入侵或潜伏鱼体内的病原菌的大量繁殖带来可乘之机.另一方面,据我们检测,加州鲈养殖中后期阶段直接由寄生虫引起的病害较为罕见,尽管常能检测到寄生虫,但一般数量不多,绝大多数都有更重要的病因.因此,杀虫务必谨慎,避免盲目杀虫,如一定要杀虫,也务必选择在天气稳定时并在专业人士的指导下进行.
3. 选好饲料,科学投喂,切忌过度投喂.
鰤鱼诺卡氏菌以腐生为主,在腐败变质的冰鲜杂鱼中容易大量繁殖.要预防诺卡氏菌病,首先要选用不带病原菌的优质配合饲料,切断感染的食源途径.其次,加州鲈摄食易受天气、光照等影响,波动幅度较大,在投喂过程中应坚持定质定量的原则,维持相对稳定的投喂量,切忌过饱投喂；否则,一旦摄食过饱,消化不良,体质亚健康,免疫力下降,很容易感染、爆发诺卡氏菌病.
此外,据相关研究,回归感染试验,腹腔注射感染1 周后即出现死亡病例,而口灌及浸泡感染约2 周后才出现死鱼,这表明鰤鱼诺卡氏菌是一种慢性致病菌.因此,平时巡塘和投喂时应注意观察鱼群状态和体表特征,一旦遇到游边、迟钝的病鱼,应仔细、全面检查有无诺卡氏菌病症状,及时发现,及时治疗.
六、治疗方案
在农业部公布的10 种抗微生物渔药中,强力霉素和氟苯尼考对诺卡氏菌的抑杀作用相对较好,但由于诺卡氏菌损伤免疫器官和药物难以渗透肉芽肿组织触杀病原菌等原因,治疗仅在感染初期有良好效果.
方法论文参考资料：
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